绵羊原代Cajal间质细胞的分离培养与鉴定

作者：付强; 李胜男; 胡新艳; 田瑞鑫; 李祯; 郭妍婷; 赵新艳; 陈俊贞; 姚刚^*; 史慧君^*

来源：中国兽医学报, 2020, 40(06): 1188-1192.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.06.20

• 绵羊
• Cajal间质细胞
• 细胞分离与培养
• c-Kit

采集美利奴绵羊的十二指肠,在解剖显微镜下剥去黏膜层及黏膜下层,剪碎后采用Ⅱ型胶原酶和胰酶消化并分离获得绵羊十二指肠原代Cajal间质细胞(ICC);传代培养后,通过倒置显微镜观察不同时间的细胞形态,使用反转录PCR和免疫荧光染色检测ICC特异性标记物c-Kit。结果显示,成功分离了ICC,且细胞在培养24 h后贴壁,呈现出其固有的形态。RT-PCR检测c-kit基因为阳性,免疫荧光染色鉴定ICC表达c-Kit蛋白。本试验成功分离ICC且传代后细胞稳定增殖生长,为后期开展病原微生物导致ICC改变造成胃肠道炎性病变提供材料。

• 单位
  新疆农业大学