芦笋茎尖遗传转化体系的建立与优化

作者：张园; 刘正杰; 林春; 闫亚泽; 袁加红; 王入; 毛自朝^*; 杨焕文^*

来源：西北农业学报, 2020, 29(01): 109-116.

• 芦笋
• 茎尖
• 遗传转化
• 参数优化
• GUS
• qRT-PCR

通过优化根癌农杆菌 EHA105(含有pBI121表达载体)介导的茎尖遗传转化条件,包括抑菌抗生素类型及浓度、农杆菌浓度、侵染时间、共培养时间、卡那霉素浓度等影响因素,建立芦笋品种‘达宝利’遗传转化体系。以0.1～0.3 cm长的芦笋茎尖为转化受体,用MS液体培养基(MS+蔗糖3%+乙酰丁香酮150μmol·L-1)悬浮菌体至OD600为0.6,侵染茎尖15 min,20℃避光共培养4 d;抗性茎尖在筛选培养基(1/2 MS+IBA 0.5mg·L-1+KT 0.1mg·L-1+嘧啶醇0.5mg·L-1+羧苄青霉素200mg·L-1+卡那霉素50mg·L-1)上诱导长芽与生根,可获得抗性植株,经PCR、 GUS组织化学染色和qRT-PCR检测,获得阳性植株。

• 单位
  云南农业大学