摘要

目的:建立金黄色葡萄球菌感染的新西兰兔脓胸模型,观察其胸腔内是否有生物被膜形成。方法:选取24只健康雄性新西兰兔按随机数字表法分为实验组和对照组,各12只。通过胸腔穿刺术于右侧第六肋间隙将导管置入胸腔,实验组注射剂量为2 mL/kg的108 CFU/mL金黄色葡萄球菌,对照组使用相同剂量的Luria-Bertani (LB)肉汤。建模后持续饲养并于第4天收集胸腔留置导管进行活菌计数和结晶紫染色。收集所有脓性絮状物的匀浆液和洗涤液用于菌落计数。切取壁层胸膜组织进行苏木精-伊红(HE)染色,观察胸膜病理改变情况;肽核酸荧光原位杂交(PNA-FISH)用于观察脓性絮状物中的生物被膜形成。结果:与对照组比较,实验组患侧胸腔有脓性絮状物形成和胸膜粘连。实验组导管菌落计数显著大于对照组(P<0.01),结晶紫染色OD值显著高于对照组(P<0.05)。通过计算匀浆液和洗涤液的CFU,验证了实验组胸腔内积聚了大量金黄色葡萄球菌。HE染色结果显示,实验组胸膜明显增厚,并伴随有大量炎症细胞浸润。PNA-FISH结果证实实验组兔子胸腔脓性絮状物中有生物被膜形成。结论:金黄色葡萄球菌致新西兰兔脓胸感染模型中,胸膜腔内存在生物被膜。