水牛IFN-γ在毕赤酵母中的表达及其单克隆抗体的制备

作者：邹新峰; 郭爱珍; 陈颖钰; 胡长敏; 王冰; 刘晓乐; 谢倩; 姜勇; 张策; 陈焕春

来源：动物医学进展, 2013, (06): 71-77.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2013.06.041

• 水牛
• γ干扰素
• 毕赤酵母
• 双抗体夹心酶联免疫吸附试验
• 单克隆抗体 Bubalus bubalus
• IFN-γ
• Pichia pastoris expression system
• double-antibody sandwich ELISA
• monoclonal antibody

本研究旨在建立水牛IFN-γ(Bubalus bubalus IFN-γ,Bb IFN-γ)体外释放检测法,为定量检测水牛IFN-γ、开发水牛结核病及其他疫病的检测技术奠定基础。克隆了水牛IFN-γ成熟肽基因片段,根据测序结果,在不改变氨基酸序列的情况下,将密码子替换成毕赤酵母偏爱密码子并合成全基因,进一步用毕赤酵母GS115表达了水牛IFN-γ成熟肽基因。通过水疱性口炎病毒(VSV)在牛肾细胞(MDBK)上检测了其抗病毒活性,抗VSV活性为7.44×105 U/mL。利用酵母表达的水牛IFN-γ蛋白免疫Balb/c小鼠,并筛选阳性杂交瘤细胞,获得5株高效价的单克隆抗体。利用该重组蛋白免疫日本...

• 单位
  动物科技学院; 华中农业大学; 农业微生物学国家重点实验室