通过抑制铁死亡减轻脓毒症引起急性肺损伤的研究

作者：孔维轩; 杨鹏杰; 魏起友; 朱贲贲^*

来源：联勤军事医学, 2023, 37(12): 998-1022.

DOI：10.13730/j.issn.2097-2148.2023.12.002

• 铁死亡
• 谷胱甘肽过氧化物酶4
• 脂质过氧化
• 急性肺损伤
• Liproxstatin-1

目的 观察盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture, CLP)造成的急性肺损伤(acute lung injury, ALI)小鼠模型铁死亡水平及炎症指标；观察药物liproxstatin-1干预铁死亡后，小鼠铁死亡水平及炎症指标的变化。方法 选取24只C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组、CLP组、Lip-1组、CLP+Lip-1组，每组6只。假手术组和Lip-1组进行假手术，CLP组和CLP+Lip-1组进行CLP手术(盲肠结扎+穿刺术建立脓毒症动物模型);Lip-1组和CLP+Lip-1组术前腹腔注射liproxstatin-1(0.8 mg/kg),假手术组、CLP组注射同体积生理盐水；术后16 h处死小鼠，收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)和肺组织。测定各组小鼠左肺叶肺组织湿/干重比(wet to dry weight ratio, W/D),苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色观察各组小鼠右上肺叶病理形态表现，检测BALF中的总蛋白浓度、肿瘤坏死因子α (tumour necrosis factor alpha, TNF-α)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)表达情况。采用Western blot检测各组小鼠肺组织中谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、环氧合酶2(cyclooxygenase 2,COX-2)和长链脂酰辅酶A合成酶4(acetyl coenzyme A synthetase long-chain family 4,ACSL4)蛋白表达水平。采用免疫组织化学法检测小鼠肺组织丙二醛(malondialdehyde, MDA)、4-羟基壬烯醛(4-Hydroxynonenal, 4-HNE)表达情况。采用试剂测定铁离子表达情况。结果 与假手术组比较，CLP组小鼠肺组织W/D明显升高(P<0.01);病理切片显示，CLP组支气管壁充血严重，存在明显炎性细胞浸润，肺泡壁充血严重，肺部存在明显纤维化；CLP组BALF中的总蛋白浓度、IL-6及TNF-α表达明显增加(P均<0.01),GPX4表达下降，ACSL4、COX-2、MDA、4-HNE表达，铁离子含量明显升高(P均<0.05)。与CLP组比较，CLP+Lip-1组肺组织W/D明显下降(P<0.01);病理切片显示，CLP+Lip-1组可见支气管壁充血与少量明显炎性细胞浸润，其中少数肺泡壁充血，肺部轻度纤维化，治疗效果显著；CLP+Lip-1组BALF中的总蛋白浓度、IL-6及TNF-α表达均明显降低(P均<0.01),GPX4表达升高，ACSL4、COX-2、MDA、4-HNE表达、铁离子含量明显下降(P均<0.05)。结论 铁死亡参与了脓毒症导致的ALI,通过抑制铁死亡，能对脓毒症导致的ALI起到一定的治疗作用。

• 单位
  内蒙古医科大学; 北京市肿瘤防治研究所; 内蒙古自治区人民医院