CSE联合LPS诱导制备BEAS-2B细胞炎症损伤模型的正交实验研究

作者：何转霞; 齐鑫鑫; 刘涛^*

来源：毒理学杂志, 2022, 36(04): 316-325.

DOI：10.16421/j.cnki.1002-3127.2022.04.005

• BEAS-2B细胞
• 香烟烟雾提取物
• 脂多糖
• 正交试验

目的 采用正交实验设计，探讨香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract, CSE)联合细菌脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导制备人支气管上皮细胞(BEAS-2B)的炎症损伤模型的最优条件。方法 采用MTT法绘制BEAS-2B细胞生长曲线；采用MTT法检测CSE对BEAS-2B细胞的半数抑制浓度(IC50);采用Griess法检测LPS对BEAS-2B细胞培养上清液中NO含量的影响；以处理时间、CSE和LPS为正交实验3个因素，每个因素设定3个水平，分别为处理时间(12、24和36 h),CSE浓度(0.45%、0.9%和1.8%),LPS浓度(0.5、1和2.5μg/ml),根据三因素三水平正交实验设计表，得到9个实验组，分别按相应条件处理，使用ELISA法检测各组细胞培养上清液中炎症因子IL-8的含量判定建立BEAS-2B细胞炎症损伤模型的最优组合条件。结果 BEAS-2B细胞第1天进入对数生长期；CSE作用于BEAS-2B细胞24 h的IC50为3.6%;当LPS浓度在0.5～2.5μg/ml时，其作用于BEAS-2B细胞产生NO含量明显高于空白对照组；影响BEAS-2B细胞炎症损伤的主次因素顺序为作用时间>LPS>CSE,0.9%CSE联合0.5μg/ml LPS作用24 h为最优组合条件，此时细胞培养上清液中IL-8含量较对照组明显增加，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CSE联合小剂量LPS作用BEAS-2B细胞24 h建立的炎症损伤模型，稳定可靠，重复性好，接近人体COPD炎症的病理生理状态，可用于呼吸系统炎症损伤相关疾病防治药物的筛选及发病机制的研究。

• 单位
  新疆医科大学; 公共卫生学院