建立双重荧光定量PCR方法检测蜱传疏螺旋体

作者：杨小娜; 张琳; 侯学霞; 郝琴^*

来源：中国人兽共患病学报, 2021, 37(09): 788-794.

• 伯氏疏螺旋体
• Borrelia miyamotoi
• 双重荧光定量PCR

目的建立双重荧光定量PCR方法,同时检测Borrelia burgdorferi和Borrelia miyamotoi。方法分别利用recA基因、glpQ基因合成引物探针,并优化反应条件。在单重实验的基础上建立双重荧光定量PCR方法,对该方法灵敏度和特异度进行检测,并探索其他因素对反应结果的影响。使用模拟样本和实际样本评价新方法的检测效用。结果双重荧光定量PCR方法具有良好的灵敏度和特异度,与单重实验方法比较,检测Ct值无明显差异(P>0.05),病原浓度与检测Ct值具有良好的线性相关关系。两种病原浓度差异和其他病原的存在对检测结果无明显影响。使用该方法检测模拟蜱样本和实际蜱样本具有良好的实用性。结论本实验建立的多重荧光定量PCR方法能快速便捷的检测两种疏螺旋体,为蜱样本病原鉴定提供了有价值的检测工具。

• 单位
  传染病预防控制国家重点实验室; 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所