DR4去甲基化对髓性白血病K562细胞增殖凋亡作用的研究

作者：张曼; 蔡林衡; 杨海平^*; 杨学文; 司晓慧

来源：中国实验血液学杂志, 2021, 29(02): 422-427.

DOI：10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2021.02.018

• 髓性白血病
• 肿瘤坏死因子死亡受体4
• 去甲基化
• 增殖
• 凋亡

目的:研究肿瘤坏死因子死亡受体(DR) 4去甲基化对髓性白血病K562细胞增殖、凋亡的影响。方法:取对数期K562细胞,采用地西他滨(DCA) 0、0.8、1.6、3.2μmol/L干预,分别设为对照、DCA低剂量、DCA中剂量和DCA高剂量4组。取对照组细胞,采用肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL) 0.5μg/ml干预24 h,设置为TRAIL组;取DCA高剂量组细胞,采用TRAIL 0.5μg/ml干预24 h,设置为DCA高剂量+TRAIL组。甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测对照组和DCA低、中、高剂量组DR4基因启动子甲基化状态;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot检测对照组和DCA低、中、高剂量组DR4 mRNA及蛋白相对表达量;二甲基噻唑(MTT)法检测对照组、DCA高剂量组、TRAIL组、DCA高剂量+TRAIL组细胞增殖抑制率;流式细胞术检测对照组、DCA高剂量组、TRAIL组、DCA高剂量+TRAIL组细胞的凋亡率。结果:对照组细胞呈甲基化阳性状态,DCA低、中、高剂量组甲基化条带亮度逐渐降低至消失,DCA高剂量组呈甲基化阴性状态;对照组和DCA低、中、高剂量组DR4 mRNA及蛋白相对表达量依次升高(r=0.624、0.704);对照、DCA高剂量、TRAIL、DCA高剂量+TRAIL组24、48和72 h增殖抑制率、凋亡率依次升高(r=0.653、0.754、0.709,0.725)。结论:DCA可逆转ML K562细胞中DR4基因启动子甲基化水平,上调DR4表达,可能会增强TRAIL对K562细胞的增殖抑制及凋亡促进作用。

• 单位
  新乡医学院; 河南科技大学第一附属医院