加味宫外孕Ⅱ号方对HTR-8/SVneo细胞内质网应激JNK信号通路的凋亡作用

作者：简咏男; 郑文兰^*

来源：中国医药导报, 2021, 18(03): 4-16.

• 内质网应激
• JNK信号通路
• HTR-8/SVneo细胞
• 加味宫外孕Ⅱ号方
• 细胞凋亡

目的基于内质网应激JNK信号通路研究加味宫外孕Ⅱ号方对滋养细胞凋亡的影响。方法取36只雌性SD大鼠,体重180～220 g,采用随机数字表法分为六组,每组6只,即阴性对照组(中药中剂量等体积的生理盐水),中药低、中、高剂量组[12、24、48 g/(kg·d)],西药组(中药中剂量等体积的生理盐水+肌注甲氨喋呤7.775 mg/kg),中西药结合组(中药中剂量24 g/kg+肌注甲氨喋呤7.775 mg/kg),中药处理8 d后和西药给药1次后采血并分离血清。将不同组别的含药血清分别与HTR-8/SVneo细胞共同培养24 h后,运用Western blot检测IRE1α、TRAF2、ASK1、JNK1、JNK2、p-JNK蛋白和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测IRE1α、TRAF2、ASK1、JNK1、JNK2 mRNA表达情况。另设未用血清处理的细胞作为空白对照组,以排除血清成分复杂所带来的干扰。结果与空白对照组比较,阴性对照组IRE1α、TRAF2、ASK1、JNK1、JNK2、p-JNK蛋白表达量和IRE1α、TRAF2、ASK1、JNK1、JNK2m RNA表达量无明显变化(P> 0.05)。与阴性对照组比较,中药各剂量组、西药组和中西药结合组JNK1、JNK2蛋白表达量无明显变化(P> 0.05),而IRE1α、TRAF2、ASK1、p-JNK蛋白和IRE1α、TRAF2、ASK1、JNK1、JNK2 mRNA表达量均增加,差异均有统计学意义(均P <0.05);中药高剂量组IRE1α、TRAF2、p-JNK蛋白和IRE1α、TRAF2、JNK1、JNK2 m RNA表达量均高于中药中、低剂量组,差异均有统计学意义(均P <0.05);中药中剂量组IRE1α、ASK1、p-JNK蛋白和IRE1α、ASK1、JNK1 mRNA表达量均高于中药低剂量组,差异均有统计学意义(均P <0.05);与中药高剂量组比较,西药组和中西药结合组IRE1α、ASK1、p-JNK蛋白和IRE1α、JNK1 mRNA表达量均增加,差异均有统计学意义(均P <0.05);与西药组比较,中西药结合组IRE1α蛋白和IRE1α、ASK1、JNK1、JNK2 mRNA表达量无明显变化,差异无统计学意义(P> 0.05),ASK1蛋白表达量增加,而TRAF2、p-JNK蛋白表达量和TRAF2m RNA表达量均减少,差异均有统计学意义(均P <0.05)。结论加味宫外孕Ⅱ号方能引发内质网过度应激并激活JNK信号通路,进而促使细胞凋亡,且可能存在剂量相关性。

• 单位
  贵州中医药大学