基于16S rDNA扩增子测序探究脱氧胆酸对肠型胃癌模型INS-GAS小鼠胃内菌群结构的影响

作者：金多晨; 黄可婷; 徐妙; 党旖旎; 张国新^*

来源：南京医科大学学报(自然科学版), 2022, 42(12): 1651-1657.

• 脱氧胆酸
• INS-GAS小鼠
• 胃内菌群
• 16S rRNA,胃癌

目的：探究次级胆汁酸脱氧胆酸（deoxycholic acid,DCA）对肠型胃癌模型INS-GAS小鼠胃内菌群结构的影响。方法：将10只8周龄雄性INS-GAS小鼠随机分为2组，每组5只，一组予以0.2%DCA饮水，另一组饮用生理盐水（normal saline,NS）溶剂。另有5只同窝雄性FVB/N野生型小鼠予以0.2%DCA饮水作为基因型对照组。3个月饮水干预结束后收集各组小鼠胃内容物行16S rDNA扩增子测序，进行胃内菌群相对丰度、α多样性指数、β多样性及差异物种分析。分离胃体和胃窦黏膜组织，qRT-PCR检测肠化标志物cdx2、klf5、vil1和muc2 mRNA表达。结果：与对照组小鼠相比，DCA改变了INS-GAS小鼠胃内优势菌种，属水平上相对丰度最高的菌种由乳杆菌科菌属（61.93%）变为未定义蓝藻细菌属（58.70%）。两组小鼠胃内菌群丰度及多样性均无显著差异（ACE指数P=0.213,Chao1指数P=0.280;Shannon指数P=0.391,Simpson指数P=0.205）。主成分分析发现两组小鼠胃内菌群结构差异度大，组间差异大于组内差异（R=0.368,P=0.032）。DCA饮水促进INS-GAS小鼠胃内蓝藻细菌在门、纲、目、科和属各个水平上显著增高，毛螺菌科Anaerostipes菌属以及两种蓝藻细菌属菌种Lolium perenne和Phaseolus vulgaris丰度也显著增高。此外，DCA饮水同样导致INS-GAS小鼠胃内厚壁菌门、杆菌纲和乳杆菌（目、科和属水平）丰度显著降低，罗伊氏乳杆菌丰度也显著降低。DCA饮水的INS-GAS小鼠胃体及胃窦部黏膜组织muc2 mRNA表达均显著高于NS饮水的INS-GAS小鼠（P均<0.05）。此外，同为DCA饮水的INS-GAS小鼠胃内菌群丰度显著高于FVB/N小鼠（ACE指数P=0.022;Chao1指数P=0.028），两组小鼠组内差异大于组间差异，但尚无统计学意义（R=-0.056,P=0.647）。结论：DCA改变了INS-GAS小鼠胃内菌群结构，主要为蓝藻细菌属和毛螺菌科Anaerostipes菌属相对丰度增高，乳杆菌属相对丰度降低，且促进了胃黏膜肠化标志物muc2表达。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院