仙茅苷调节lncRNA MEG3/miR-181a-5p通路对骨质疏松大鼠成骨细胞自噬的影响

作者：王勤俭; 张睿昕^*; 张攀; 李泊泊

来源：中国骨质疏松杂志, 2023, 29(10): 1409-1465.

• 长链非编码RNA MEG3
• 骨质疏松症
• 微小RNA-181a-5p
• 成骨细胞自噬

目的 探讨仙茅苷(Curculigoside,CUR)对骨质疏松症(osteoporosis,OP)大鼠成骨细胞自噬的影响以及对lncRNA MEG3/miR-181a-5p信号轴的调节作用。方法 体外培养骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)诱导成骨细胞分化，CCK-8法筛选CUR浓度;数据库预测lncRNA MEG3与miR-181a-5p结合位点;利用转染技术将BM-MSCs细胞分为NC组、CUR组、CUR+3-MA组、CUR+pc-NC组和CUR+pc-LncRNA MEG3组，qRT-PCR检测lncRNA MEG3、miR-181a-5p的表达水平，碱性磷酸酶(ALP)染色法检测细胞ALP活性，MDC法检测细胞自噬体数量，免疫荧光检测细胞微管相关蛋白1-轻链3(LC3)、自噬效应蛋白(Beclin1)的表达。肌肉注射地塞米松磷酸钠建立OP大鼠，大鼠分为对照组(CT组)、模型组(OP组)、OP+CUR组(灌胃15 mg/kg CUR),CT检测大鼠胫骨骨形态学，Western blot和qRT-PCR分别检测LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1与lncRNA MEG3、miR-181a-5的表达。结果 25μg/m L以上浓度的CUR显著提高BM-MSCs细胞增殖活力(P<0.05); lncRNA MEG3与miR-181a-5p具有靶向结合位点;与NC组相比，CUR组细胞ALP活性、自噬体数量以及LC3、Beclin1表达增加(P<0.05);与CUR组相比，CUR+3-MA组细胞ALP活性、自噬体数量以及LC3、Beclin1表达减少(P <0.05);与CUR+pc-NC组相比，CUR+pc-LncRNA MEG3组细胞ALP活性、自噬体数量以及LC3、Beclin1表达减少(P<0.05)。OP组大鼠骨形态学评价以及LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、miR-181a-5p表达较CT组下降，lncRNA MEG3表达增加(P <0.05); OP+CUR组大鼠骨形态学评价以及LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、miR-181a-5p表达较OP组增加，lncRNA MEG3表达降低(P<0.05)。结论 CUR可能通过调节LncRNA MEG3/miR-181a-5p信号轴促进OP大鼠成骨细胞自噬活性。

• 单位
  河南中医药大学; 河南省中医院