黑曲霉单宁酶基因在毕赤酵母中的表达

作者：唐佳代; 周罗娜; 邱树毅; 吴鑫颖^*; 胡娜; 王艳

来源：食品科技, 2018, 43(09): 47-55.

DOI：10.13684/j.cnki.spkj.2018.09.009

• 单宁酶
• 黑曲霉
• 毕赤酵母
• 诱导表达
• 酶学性质

单宁酶(EC3.1.1.20)在食品、化工及医药等领域应用广泛,期望通过单宁酶在毕赤酵母中的表达来提高单宁酶的产量。以经室温常压等离子体诱变技术诱变得到的较高产单宁酶的黑曲霉B1401的总DNA为模板,PCR扩增获得单宁酶基因(tan)后构建重组表达载体pPIC9K-tan,通过电转化至毕赤酵母GS115,利用甲醇诱导培养重组菌获得单宁酶。单宁酶的最适反应温度为30℃,最适反应pH为5.0,最高酶活力可达到34.25 U/g,相较于黑曲霉B1401产单宁酶活力提高了1.38倍,Ca2+、Fe3+、Mn2+等金属离子对重组单宁酶酶活力影响不大。实验结果表明实现了单宁酶在毕赤酵母中的高效表达。

• 单位
  贵州省生物技术研究所; 贵州大学; 贵州省农业科学院