白藜芦醇对脂多糖诱导人视网膜色素上皮ARPE-19细胞损伤的保护机制研究

作者：宋慧; 王英豪^*

来源：中国中医眼科杂志, 2021, 31(04): 238-244.

DOI：10.13444/j.cnki.zgzyykzz.2021.04.002

• 白藜芦醇
• 人视网膜色素上皮细胞
• Aldolase/AMPK信号通路

目的观察白藜芦醇(RES)对脂多糖(LPS)诱导人视网膜色素上皮(hRPE) ARPE-19细胞损伤的保护作用,及其对Aldolase/AMPK信号通路的影响。方法将细胞分为5组:(1)对照组(NC组),采用正常完全培养液培养;(2)LPS组,采用含100 ng/mL的LPS培养液培养;(3)LPS+RES组(LR组),采用100 ng/mL的LPS和40μM的RES共同处理;(4)LPS+二氢脱氧吗啡(CC)组(LC组),采用100 ng/mL的LPS和10μM的CC共同处理;(5)LPS+CC+RES组(LCR组),采用100 ng/mL的LPS和10μM的CC和40μM的RES共同处理。5组均处理24 h后,通过CCK8法和Hoechst染色法检测ARPE-19细胞增殖活性,流式细胞术检测ARPE-19细胞凋亡率和线粒体膜电压(MMP),ATP测定试剂盒分析ARPE-19细胞中ATP含量,Westernblot分析ARPE-19细胞中Aldolase和p-AMPK蛋白的表达水平。结果 (1)ARPE-19细胞增殖:NC组、LPS组和LR组之间比较,差异具有统计学意义(F=108.412,P=0.000)。组间两两比较均有统计学意义(P<0.05)。(2)ARPE-19细胞凋亡:NC组、LPS组和LR组之间比较,差异具有统计学意义(F=43.437,P=0.000)。组间两两比较均有统计学意义(P<0.05)。(3)ARPE-19细胞ATP水平:NC组、LPS组和LR组之间比较,差异具有统计学意义(F=46.803,P=0.000)。组间两两比较均有统计学意义(P<0.05)。(4)ARPE-19细胞的MMP:NC组、LPS组和LR组之间比较,差异具有统计学意义(F=57.815,P=0.000)。与NC组比较,LPS组明显降低(P<0.05),LR组降低不明显(P>0.05);与LPS组比较,LR组明显升高(P<0.05)。(5)p-AMPK蛋白表达水平:5组比较,差异有统计学意义(F=19.804,P=0.000)。与NC组比较,LPS组、LR组和LC组升高(P<0.05),LCR组升高不明显(P>0.05)。与LPS组比较,各组均有统计学意义(P<0.05)。与LR组比较,各组均有统计学意义(P<0.05)。与LC组比较,LCR组升高不明显(P>0.05)。(6)细胞增殖活力:5组比较,差异有统计学意义(F=31.209,P=0.000)。与NC组比较,各组均有统计学意义(P<0.05)。与LPS组比较,LR组和LC组有统计学意义(P<0.05),LCR组升高不明显(P>0.05)。与LR组比较,各组均有统计学意义(P<0.05)。与LC组比较,LCR组升高(P<0.05)。(7)ARPE-19细胞Aldolase表达:NC组、LPS组和LR组之间比较,差异具有统计学意义(F=51.024,P=0.000)。与NC组比较,各组均有统计学意义(P<0.05);与LPS组比较,LR组升高(P<0.05)。结论 RES可通过调节Aldolase/AMPK信号通路活性改善LPS诱导的hRPE细胞损伤。

• 单位
  恩施土家族苗族自治州中心医院