miR-23b-3p对卵巢癌细胞SKOV3中Fas基因表达的调控

作者：摆茹; 杨伟; 黄菱

来源：宁夏医科大学学报, 2016, 38(10): 1103-1094.

DOI：10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2016.10.002

• miR-23b-3p
• 卵巢癌
• Fas
• 荧光报告基因实验

目的预测并鉴定miRNA-23b-3p在人卵巢癌细胞SKOV3中的靶基因及其对靶基因的调控方式。方法利用生物信息学技术预测并筛选Hsa-miRNA-23b-3p的候选靶基因,建立双荧光素酶报告基因分析系统,验证miR-23b-3p对候选靶基因的直接靶定作用;采用miR-23b-3p minics转染SKOV3细胞后,定量PCR和Western blotting分别检测转染细胞中靶基因的m RNA和蛋白表达水平的变化,分析miR-23b-3p对靶基因的调控机制。结果生物信息学预测结合靶基因功能分析,选择与卵巢癌发生发展密切相关的Fas作为miRNA-23b的候选靶基因,双荧光素酶报告基因实验证实miR-23b-3p可以直接靶定Fas基因的3’UTR。转染miR-23b-3p minics后,Fas mRNA表达水平无显著改变,但蛋白表达水平降低。结论在卵巢癌细胞SKOV3中,miR-23b-3p通过结合Fas基因3’UTR的结合位点负性调控其表达。

• 单位
  宁夏医科大学; 宁夏回族自治区第三人民医院; 基础医学院