正源方抗肝纤维化的网络药理学预测分析及实验验证

作者：庞夏云; 任美; 苏洁; 周瑞^*; 刘妍如; 宋忠兴; 唐志书^*

来源：中国现代中药, 2023, 25(10): 2135-2146.

DOI：10.13313/j.issn.1673-4890.20230530002

• 正源方
• 肝纤维化
• 网络药理学
• 分子对接
• 细胞实验
• 磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B信号通路

目的：基于网络药理学、分子对接技术预测正源方抗肝纤维化的作用机制，并进行细胞水平实验验证。方法：使用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）及文献检索获得正源方活性成分，通过PubChem、SwissTargetPrediction、Similarity Ensemble Approach数据库筛选活性成分潜在靶点，通过OMIM、GeneCards疾病数据库收集肝纤维化的相关靶点，运用Venny平台获得正源方与肝纤维化交集靶点，利用String数据库建立蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络，并通过Cytoscape-CytoNCA拓扑分析筛选核心靶点，利用String数据库进行基因本体功能注释（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析，利用Cytoscape软件构建药物-成分-靶点-通路网络，使用AutoDock Vina软件模拟关键候选活性成分与核心基因的结合活性。建立人转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肝星状细胞LX2活化模型，噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞活性，蛋白免疫印迹法（WB）检测磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B (PI3K-Akt)信号通路相关蛋白表达。结果：网络药理学筛选得到正源方活性成分145个及相关靶点1109个，肝纤维化靶点1573个，正源方抗肝纤维化潜在作用靶点415个，拓扑分析得关键靶点61个；PPI网络分析核心靶点为Akt1、血管内皮生长因子A (VEGFA)、白细胞介素-1β (IL-1β)等，GO富集分析得到1753个条目，其功能主要与细胞凋亡、细胞增殖、酶结合等有关；KEGG富集分析得到174个条目，主要涉及癌症通路、PI3K-Akt通路、细胞凋亡通路等；分子对接显示，槲皮素、木犀草素、熊果酸等与Akt1、VEGFA、Jun原癌基因（JUN）等靶点结合活性较强；细胞实验结果表明，不同剂量的正源方给药后，可以显著抑制TGF-β1诱导的LX2细胞的活化，降低磷酸化PI3K (p-PI3K)/PI3K、磷酸化Akt (p-Akt)/Akt蛋白表达，且具有质量浓度依赖性。结论：正源方可能通过多靶点、多通路发挥抗肝纤维化作用，其机制可能与抑制肝星状细胞活化、调控PI3K-Akt信号通路有关。

• 单位
  陕西中医药大学; 中国中医科学院