应用噬菌体展示技术筛选乙型肝炎病毒核心启动子结合蛋白

作者：张忠东; 成军; 钟彦伟; 王业东; 董菁; 陈天艳; 杨倩; 张树林; 刘妍

来源：Y200401005, 2004, (01): 16-19.

• 噬菌体展示技术
• 乙型肝炎病毒核心启动子
• 筛选 phage display
• HBV core promoter
• screening

目的　通过筛选乙型肝炎病毒 (HBV)核心启动子 (corepromoter)结合蛋白 ,为HBV复制机制的研究探索新的途径。方法　应用噬菌体表面展示技术 ,以HBV核心启动子的聚合酶链反应产物作为固相筛选分子 ,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行 5轮“吸附 洗脱 扩增”的筛选过程 ,经噬斑的PCR扩增后 ,构建克隆载体 ,最后对所筛选克隆进行DNA序列分析和同源性搜索。结果　噬菌体经富集后 ,从随机筛选的 2 0个克隆中得到 6个阳性克隆 ,成功构建了克隆载体。序列测定后经过同源性搜索 ,确定了和HBV核心启动子结合的肝细胞蛋白———羧肽酶N(CPN)。结论　用噬菌体人肝cDNA文库筛选得到...

• 单位
  解放军第302医院