MiR-579-3p靶向肌动蛋白相关蛋白3B调控口腔鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的机制研究

作者：高功杰^*; 王海业; 李晓彦

来源：口腔颌面外科杂志, 2020, 30(03): 156-162.

• miR-579-3p
• 肌动蛋白相关蛋白3B
• 口腔鳞状细胞癌
• 细胞增殖
• 凋亡

目的 :探讨miR-579-3p对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:培养正常人口腔角质形成细胞(normal human oral keratinocyte,NHOK)和OSCC细胞系CAL27、CAL33、SCC15,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测细胞中miR-579-3p和肌动蛋白相关蛋白3B(actin-related protein 3B,ACTR3B)信使RNA(mRNA)的表达水平,蛋白质印迹法(western blot)检测ACTR3B蛋白表达水平。以CAL33细胞为研究对象,构建过表达miR-579-3p或沉默ACTR3B表达的CAL33细胞,四甲基噻唑蓝染色法(methylthiazoletrazolium,MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和活化的半胱天冬酶-3(C-caspase-3)蛋白水平。Starbase生物信息学软件预测ACTR3B可能是miR-579-3p的靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证miR-579-3p和ACTR3B调控关系。结果 :与NHOK细胞比较,OSCC细胞系CAL27、CAL33和SCC15中miR-579-3p表达水平降低(P<0.05),ACTR3B mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。过表达miR-579-3p或沉默ACTR3B表达均可降低CAL33细胞存活率和CyclinD1蛋白表达水平(P<0.05),提高CAL33细胞凋亡率和C-caspase-3蛋白表达水平(P<0.05)。miR-579-3p靶向负调控ACTR3B表达。过表达ACTR3B降低了过表达miR-579-3p对CAL33细胞存活率、凋亡率及CyclinD1和C-caspase-3蛋白表达的影响。结论:过表达miR-579-3p可能通过下调ACTR3B表达抑制OSCC细胞增殖,并诱导细胞凋亡。

• 单位
  郑州人民医院; 郑州大学第一附属医院