干扰基本同源物增强子基因的表达对黑色素瘤细胞增殖、迁移和细胞周期的影响

作者:肖东兴; 熊钰祯; 贺新强; 赵冲; 严朝晓; 王传家; 赵明权
来源:南昌大学学报(医学版), 2023, 63(01): 14-72.
DOI:10.13764/j.cnki.ncdm.2023.01.003

摘要

目的 探讨基本同源物增强子(enhancer of rudimentary homolog, ERH)基因敲除对恶性黑色素瘤(malignant melanoma, MM)细胞增殖、迁移和细胞周期的影响及机制。方法 采用免疫组织化学法检测ERH在MM组织和正常皮肤组织中的表达水平,并分析ERH的表达与MM患者临床病理参数的关系。sh-ERH转染MM细胞系,分为Lvsh-NC组和Lvsh-ERH组;CCK-8实验检测各组细胞的增殖能力;流式细胞仪检测各组细胞的周期比率和凋亡水平;Transwell实验检测各组细胞的迁移能力;Western blotting检测抑制ERH对MM细胞系中p21、CDK2、Cyclin E、Cleaved-Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。结果 与正常皮肤组织相比,ERH在MM组织中的表达上调(P<0.001),ERH表达与肿瘤分期和淋巴转移风险相关(P<0.05)。Lvsh-ERH转染MM细胞后,细胞的增殖和迁移能力均显著降低(P<0.001);与Lvsh-NC组相比,Lvsh-ERH组细胞凋亡率显著增加,且细胞周期阻滞在G0/G1期(P<0.01);转染Lvsh-ERH可显著增加MM细胞p21、Cleaved-Caspase-3和Bax蛋白表达,并降低CDK2、Cyclin E和Bcl-2表达(P<0.01)。结论 ERH在MM组织和细胞中均表达上调,抑制MM细胞中ERH的表达可能会降低其增殖、迁移和细胞周期转化能力,抑制MM的恶性进展。靶向ERH可能是治疗MM的潜在分子靶点。

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