摘要

目的探讨piwil2诱导的肿瘤样干细胞(piwil2-iCSCs)来源的差异piRNA NU13对肾母细胞瘤细胞(G401)生物学行为的影响。方法 RT-qPCR检测G401中piRNA NU13及NOP56的表达情况;通过脂质体转染技术,在肾母细胞瘤细胞株G401中过表达及抑制piRNA NU13,并用RT-qPCR技术验证转染后G401细胞中piRNA NU13的表达量;通过CCK8检测转染后G401细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡能力,划痕实验和Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力的改变;通过双荧光素酶实验检测NOP56与piRNA NU13的结合情况;通过Western blot检测MMP2、MMP9、BAX、Bcl2、NOP56蛋白表达情况。结果在人肾母细胞瘤细胞G401中piRNA NU13表达水平低于肾小管上皮细胞HK2(P<0.05);NOP56在G401及肾母细胞瘤组织均高表达(P<0.05);在G401中上调piRNA NU13表达能够抑制肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭,并促进肿瘤细胞凋亡(P<0.05);过表达piRNA NU13可抑制MMP2、MMP9及Bcl2的表达水平,促进BAX表达(P<0.05);piRNA NU13与预测靶基因NOP56非直接结合,但可间接调控NOP56的表达。结论 piRNA NU13在肾母细胞瘤中低表达,NOP56在肾母细胞瘤中高表达,pi NU13可能间接调控NOP56表达从而抑制肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭,促进其凋亡。

  • 单位
    重庆医科大学附属儿童医院