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摘要
为研究日本沼虾肌抑素前体肽(MSTNpp)对生长的作用机理,实验采用枯草芽孢杆菌表达日本沼虾肌抑素前体肽蛋白,按照枯草芽孢杆菌的偏爱密码子,对MSTNpp基因序列进行优化合成BsMSTNpp,构建得到重组表达质粒pGJ105-BsMSTNpp。经枯草芽孢杆菌转化、发酵及Western blot鉴定,结果显示重组MSTNpp蛋白分子量约为36.0 kD。重组MSTNpp表达量随发酵时间延长逐渐升高, 100h表达量相对于24h提高了10倍。为验证表达产物的生物活性,选择平均体重为(1.52±0.11) g,平均体长为(4.55±0.21) cm的健康日本沼虾,随机分为4组,每组3个重复,每个重复200尾,在日本沼虾基础饲料中添加0.5‰和1‰重组枯草芽孢杆菌菌剂(109 CFU/g),作为实验组1和实验组2;投喂日本沼虾基础饲料,作为对照组1,在日本沼虾基础饲料中添加1‰空白枯草芽孢杆菌,作为对照组2;试验周期30d。结果显示,实验组1、实验组2日本沼虾特定生长率显著高于对照组1(P<0.05),和对照组2间不存在显著性差异;实验组1、实验组2的肌酸激酶(Creatine kinase, CK)活性显著高于对照组(P<0.05)。结果表明,重组表达MSTNpp枯草芽孢杆菌能有效提高日本沼虾CK酶活性,推测MSTNpp通过促进肌细胞增殖和分化提高肌肉组织生长,从而进一步影响日本沼虾生长速度。实验结果可以为进一步研究肌抑素前体肽应用于日本沼虾养殖提供技术支撑。
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单位生命科学学院; 绍兴文理学院
