摘要
本试验旨在探讨黄芪多糖(APS)对地塞米松(DEX)诱导的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)凋亡的保护作用。采用不同浓度的APS(0~0.8 mg/m L)或DEX(0~0.7 mg/m L)处理IPEC-J2细胞24 h,利用细胞计数试剂(CCK-8)检测细胞活性,确定药物作用浓度。对照组无添加,A组添加0.4 mg/m L APS培养,D组添加0.4 mg/m L DEX培养,A+D组添加0.4 mg/m L APS+0.4 mg/m L DEX共培养。采用Calcein/PI细胞活性与细胞毒性检测试剂盒检测细胞的存活情况,流式细胞仪检测IPEC-J2细胞的凋亡情况,透射电子显微镜观察细胞的形态,实时荧光定量PCR检测凋亡基因Caspase3、Caspase9、Bid、Bcl-2 m RNA的相对表达量,Western-blotting检测Caspase3、Caspase9、Bid、Bcl-2蛋白的表达水平。结果表明,APS可以通过调控凋亡蛋白和基因的表达来抑制DEX诱导的IPEC-J2细胞的凋亡,恢复IPEC-J2细胞的活性,起到保护猪小肠上皮细胞作用。
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单位动物科技学院; 安徽农业大学