ISL1基因腺病毒过表达载体的构建及其诱导犬ADSCs向胰岛样细胞分化

作者：张霞; 戴鹏秀; 高登科; 阮晨梅; 王璟璐; 李佳锴; 陈奕静; 张露文; 张翊华^*

来源：中国兽医学报, 2020, 40(08): 1515-1521.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.08.15

• ISL1基因
• 腺病毒载体
• 犬ADSCs
• 胰岛样细胞

构建腺病毒重组表达载体pADTrack-ISL1-AdEasy,经293A细胞的包装和扩增,获得具有感染性的重组腺病毒,将其按感染复数(MOI)=100感染犬脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs),观察感染后4,7,10,13,16 d绿色荧光蛋白表达情况、细胞形态变化和胰岛β细胞发育相关基因的mRNA表达情况。结果显示,含ISL1基因的重组腺病毒感染犬ADSCs 48 h后,绿色荧光蛋白开始表达;13 d后犬ADSCs出现细胞形态变化,由梭形变为神经细胞样;qRT-PCR分析表明在犬ADSCs中过表达ISL1基因提高了PDX1、NGN3、MNX1、MAFA和NKX6.1基因的内源性表达。结果表明,含ISL1基因的重组腺病毒成功感染犬ADSCs,并可促进其向胰岛样前体细胞分化,具有进一步诱导形成胰岛样细胞的可能。

• 单位
  西北农林科技大学