牦牛B细胞淋巴瘤2相关蛋白A1的原核表达及体外活性

作者：梅群弟; 王海鹏; 王利^*; 傅芳; 李娟; 郑姚; 张玲

来源：兽类学报, 2022, 42(02): 196-203.

DOI：10.16829/j.slxb.150560

• B细胞淋巴瘤2相关蛋白A1(BCL2A1)
• HepG2细胞
• 细胞凋亡

为研究牦牛(Bos grunniens) B细胞淋巴瘤2相关蛋白A1 (B cell lymphoma 2 related protein A1, BCL2A1)的原核表达及体外活性。采用原核表达载体构建、细胞划痕实验、CCK-8法、透射电镜和实时荧光定量PCR等方法。结果显示，成功构建pET-32a-BCL2A1重组质粒，表达获得约33 kDa的BCL2A1。终浓度为0.02μg/mL、0.2μg/mL、2.0μg/mL的BCL2A1均能使HepG2细胞活性显著降低(P <0.05)，并在一定程度上抑制细胞的迁移。2.0μg/mL BCL2A1导致HepG2细胞核固缩，胞质中高密度物质聚集，溶酶体吞噬形成致密的凋亡小体等。此外，细胞凋亡相关基因CASP9的mRNA水平在2.0μg/mL组中显著上调(P <0.05),CASP8的mRNA水平在0.2μg/mL和2.0μg/mL组中显著上调(P <0.05)，而CASP3和Cyt c的mRNA水平在3个浓度处理组均显著上调(P <0.05)。这提示BCL2A1可能通过凋亡途径影响HepG2细胞活性，为进一步探索牦牛BCL2A1基因功能积累资料。

• 单位
  西南民族大学