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摘要
紫云英(Astragalus sinicus)是我国南方稻区主要绿肥作物之一，对土壤资源可持续利用具有重要意义，花期调控是紫云英育种中的重要目标。生物钟基因响应昼夜节律变化，通过影响光周期途径中成花基因的表达参与植物开花调控，LHY (late elongated hypocoty l)基因是关键生物钟基因之一。为探究紫云英中LHY基因的功能，本研究利用Illumina Hiseq方法和RACE(rapid-amplification of cDNA ends)克隆技术分离了紫云英LHY基因全长序列；利用生物信息学分析软件进行LHY基因的生物信息学分析；q RTPCR分析LHY基因在不同组织中的表达模式，揭示基因表达与紫云英成花的关系；并通过拟南芥(Arabidopsis thaliana)遗传转化，进一步鉴定紫云英LHY基因的功能，明确其对成花的影响。结果表明，本文首次克隆了紫云英LHY基因(GenBank No. OP455117),cDNA全长为2 865 bp，含开放阅读框长度为2259 bp，编码752个氨基酸，LHY基因的同源蛋白在不同植物间具有较高的相似性，尤其与蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)、鹰嘴豆(Cicer arietinum)、野生大豆(Glycine soja)等豆科植物相似性达75%以上。qRT-PCR分析结果显示，在紫云英叶片、花和花芽中LHY基因的表达量最高。超表达紫云英LHY基因的转基因拟南芥株系，表现出了显著的晚花性状，抽薹天数平均比野生型晚18.36 d，开花天数平均比野生型晚20.72 d，表明紫云英LHY基因可能具有晚花功能，抑制植物开花。本研究为解析紫云英开花调控机理提供了科学依据。
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