维拉帕米对糖基化终产物诱导人晶状体上皮细胞凋亡的保护作用

作者：袁梦克; 高新晓; 畅立斌^*

来源：中华眼科杂志, 2016, 52(06): 444-448.

• 糖基化终产物, 高级
• 晶体
• 上皮细胞
• 细胞凋亡
• 维拉帕米
• p38丝裂原活化蛋白激酶类

目的研究维拉帕米对糖基化终产物(AGE)诱导人晶状体上皮细胞(HLEC)凋亡的保护作用。方法实验研究。培养HLEC系SRA01/04, 传至第3代。实验分为4组, A组为对照组LEC细胞;B组为AGE组, LEC细胞用20 μmol/L AGE处理;C组为AGE+SB202190组, 15 μmol/L SB202190预处理2 h后的LEC细胞用AGE处理;D组为AGE+维拉帕米组, 50 μmol/L维拉帕米预处理2 h后的细胞用AGE处理。应用MTT法检测各组细胞活力, Annexin V试剂盒处理细胞后用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率, 通过Western blot法检测各组细胞p-p38、Caspase 3的表达情况。统计学方法为单因素方差分析, 组间的两两比较均采用LSD-t检验。结果作用24 h后, HLEC活力AGE组为0.28±0.08, 较对照组的0.97±0.05明显下降(LSD-t检验, P=0.008), AGE+SB202190组(0.79±0.06)及AGE+维拉帕米组(0.62±0.07)较AGE组(0.28±0.08)明显增加(F=34.52, P=0.001);细胞凋亡率AGE组为(19.9±1.1)%, 较对照组的(2.5±0.6)%明显上升(LSD-t检验, P=0.003), AGE+SB202190组(4.2±1.2)%及AGE+维拉帕米组(5.8±1.8)%较AGE组(19.9±1.1)%明显减少(F=371.61, P<0.01);LEC p-p38、Caspase 3蛋白表达量AGE组分别为223.35±20.15及256.77±19.88, 较对照组106.44±10.74及100.26±18.65升高, AGE+SB202190组两种蛋白表达量为139.17±19.10, 142.75±23.36, AGE+维拉帕米组则为154.79±21.87, 139.79±25.73, 较对照组降低(F=248.01, F=76.68;P<0.01)。结论维拉帕米可干预p38细胞通路, 部分抑制AGE诱导晶状体上皮细胞凋亡作用。(中华眼科杂志, 2016, 52:444-448)