表达前强啡肽基因的Ad5型腺病毒载体的构建及鉴定

作者：项红兵; 肖建斌; 招伟贤; 高巨; 徐珉

来源：中华实验外科杂志, 2008, (09): 1201-1203.

DOI：10.3321/j.issn:1001-9030.2008.09.042

• 强啡肽
• 腺病毒
• 构建
• 表达

目的构建且鉴定含前强啡肽基因(prodynorphin)的血清5型腺病毒载体(Ad5)。方法应用分子生物学方法将前强啡肽基因序列克隆入腺病毒穿梭质粒pDC316-PDP,后者与骨架质粒共转染HEK293细胞,包装得到含前强啡肽转基因的腺病毒Ad5-PDP。用聚合酶链反应(PCR)方法对转基因病毒进行鉴定,TCID50法测定病毒滴度。结果PCR法证实转基因正确插入了Ad5型病毒基因组内,且没有野生型病毒污染,病毒滴度为1×10~(12)v.p./mL。PCR鉴定Ad5- PDP重组成功。结论获得的Ad5-PDP滴度高,感染性好,可以用于转基因治疗的实验研究。

• 单位
  广州中医药大学第二附属医院; 广东省中医院