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摘要
土壤邻苯二甲酸酯(PAE)污染对生态环境和农产品安全均构成威胁。为实现PAE污染土壤的生物修复，明确共代谢基质对微生物降解PAE的影响机制，从PAE污染的大蒜中筛选获得能降解PAE的内生菌。通过生理生化特征和16S rRNA基因测序对其种属进行了鉴定，并研究了内生菌对6种PAE的共代谢降解特性，优化了共代谢降解条件，初步探索了共代谢条件下内生菌对PAE的降解代谢途径。结果表明：从大蒜中共筛选出3株能降解PAE的内生菌DGB-1、DGB-3和DGB-8,经鉴定3者皆为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)。3株菌株均能以6种PAE为碳源生长，但处理3 d后PAE的降解率仅0.89%～10.40%,降解能力较弱。添加D-纤维二糖为共代谢基质后，3株菌株对6种PAE的降解率均显著提升，其中菌株DGB-1和DGB-3处理3 d后能完全降解20 mg/L质量浓度的邻苯二甲酸二丁酯(DBP)和邻苯二甲酸丁苄酯(BBP)。以DGB-1为供试菌株，发现吐温80添加量、碳源种类、碳源浓度和接菌量对6种PAE的降解率均有显著影响，最佳降解条件为吐温80添加量0.025%,碳源为D-纤维二糖、浓度为10 mmol/L,接种菌液OD600为0.2。最佳降解条件下，当6种PAE质量浓度为50 mg/L时，邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、DBP、BBP、邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)和邻苯二甲酸二辛酯(DnOP)在MSM培养基中的降解半衰期分别为9.01 d、2.27 d、2.13 d、1.99 d、7.84 d和6.72 d。菌株DGB-1不携带质粒，其PAE降解基因位于该菌染色体上；菌株DGB-1可通过水解作用完成对DBP、DEHP和DnOP的第一步降解，但水解作用均较弱；菌株DGB-1对6种PAE的降解代谢需要其细胞膜上的呼吸链系统参与，氧化还原反应增强可显著促进菌株DGB-1对6种PAE的降解。本研究为进一步利用内生菌进行PAE污染土壤的生物修复提供理论依据。
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