奶牛气管抗菌肽(TAP)基因乳腺特异性表达载体的构建与鉴定

作者：曹随忠; 姚学萍; 崔亚飞; 杨德英; 雍康; 余树民; 刘宗平

来源：西北农林科技大学学报(自然科学版), 2013, (06): 1-7+18.

DOI：10.13207/j.cnki.jnwafu.2013.06.031

• 奶牛
• 乳房炎
• β-防御素
• 气管抗菌肽基因
• 乳腺特异性表达载体 dairy cattle
• mastitis
• β-defensin
• trachea antimicrobial peptide(TAP) gene
• mammary gland specific expressing vector

【目的】构建奶牛气管抗菌肽(TAP)基因乳腺特异性表达载体。【方法】根据GenBank中牛TAP基因cDNA序列(GenBank号:NM_174776)设计引物,从奶牛乳腺组织中RT-PCR扩增TAP基因编码序列,将其克隆到pMD19-T(simple)载体中测序。重组质粒pMD-TAP经EcoRⅠ+KpnⅠ双酶切回收目的基因片段,亚克隆到携带增强型绿色荧光蛋白的通用型乳腺特异性表达载体pBLG-EGFP中,采用脂质体法转染奶牛乳腺上皮细胞(bMEC)、COS-7细胞,并注射泌乳家兔乳腺组织,荧光显微镜检测转染细胞中绿色荧光蛋白的表达,半定量RT-PCR检测家兔乳腺组织中TAP mRNA的表达...

• 单位
  四川农业大学; 扬州大学