鸡gga-miR-31-5p启动子真核表达载体的构建及其转录因子结合位点预测

作者：邓哲宇; 王乙婷; 王颖洁; 胡菜; 吴宇慧; 赵宗仪; 左其生; 张亚妮^*

来源：浙江农业学报, 2022, 34(04): 713-719.

• 鸡
• gga-miR-31-5p
• 启动子
• 转录因子

为确定鸡gga-miR-31-5p启动子基本活性区域，并分析调控其转录的重要转录因子，初步探究影响鸡gga-miR-31-5p的表达调控机制，采用PCR法扩增鸡gga-miR-31-5p启动子，插入到pEGFP-N1载体，构建重组载体。利用菌液PCR及测序鉴定阳性重组质粒。将重组载体转染DF-1细胞系，观察其启动活性。利用在线预测网站预测gga-miR-31-5p启动子区域的转录因子结合位点。结果显示，成功克隆出gga-miR-31-5p启动子片段，并成功构建其pEGFP重组载体。体外转染结果表明，该区域具有启动活性，并发现鸡gga-miR-31-5p启动子区域存在RARα、ER、c-Jun、GR等重要转录因子结合位点。研究初步确定了鸡gga-miR-31-5p启动子区域，同时发现该区域存在重要转录因子结合位点，该结果为后续探讨进一步研究gga-miR-31-5p启动子的生物学功能奠定基础。

• 单位
  扬州大学; 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室