摘要

根据岩白菜转录组数据库中的岩白菜糖基转移酶候选基因Unigene0054989的全长序列设计引物后克隆获得BpUGTs1,并用生物信息学方法对其进行分析;采用RT-qPCR技术分析了该基因在岩白菜各组织中的表达情况;构建pBIl21-BpUGTs1-eGFP植物表达载体并转化农杆菌GV3101,使用农杆菌介导的烟草瞬时表达技术预测和观察BpUGTs1的亚细胞位置。结果表明:所获序列全长1 606 bp,可编码498个氨基酸,相对分子质量55.57 kD,属于不稳定蛋白;该序列与没食子酸葡萄糖基转移酶基因相似度高达80%以上,与茶树和阿月浑子的同源序列亲缘关系最近;亚细胞定位BpUGTs1在细胞质上;BpUGTs1在根状茎和胚性愈伤组织表达量最高。综合生物信息学分析结果、亚细胞定位和基因表达量,BpUGTs1可能是在根状茎中合成岩白菜素的关键酶基因。研究结果为该基因的后续遗传转化,基因表达和生物学功能分析提供理论基础。

全文