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摘要
该研究主要探讨了藏族药榜那生物碱成分体外和体内对骨关节炎(OA)大鼠的治疗作用及其相关机制。从2～3周SD雄性大鼠中分离软骨细胞，通过脂多糖(LPS)诱导软骨细胞构建体外关节炎损伤模型，采用MTT实验考察榜那7种生物碱(12-表-欧乌头碱、宋果灵、苯甲酰乌头原碱、乌头碱、3-乙酰乌头碱、新乌头碱、苯甲酰新乌头碱)对软骨细胞的毒性影响，后将实验分为对照组、模型组(LPS 5μg·mL-1诱导12 h)和给药组(LPS 5μg·mL-1诱导12 h后给药孵育24 h)。通过Western blot分别检测各组细胞中炎症因子环氧合酶2 (COX-2)、一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的蛋白表达情况，采用免疫荧光染色分别检测各组细胞中基质金属蛋白酶13 (MMP-13)、聚集蛋白聚糖(aggrecan)、Ⅱ型胶原(collagenⅡ)、成纤维细胞生长因子2 (FGF2)的蛋白表达情况。体内实验利用碘乙酸钠制备了大鼠骨关节炎模型，通过免疫组化检测各组大鼠软骨组织中MMP-13、TNF-α及FGF2的表达情况。结果显示，榜那中的7种生物碱成分在一定剂量范围内可使软骨细胞的存活率达到90%以上；Western blot结果显示，与模型组相比，乌头碱、12-表-欧乌头碱、宋果灵、3-乙酰乌头碱、新乌头碱可降低炎症因子COX-2、iNOS、TNF-α、IL-1β的蛋白表达；免疫荧光结果显示乌头碱、12-表-欧乌头碱、新乌头碱可抑制MMP-13的表达，上调aggrecan、collagenⅡ的表达；此外，与模型组及其他榜那生物碱成分组相比，唯有12-表-欧乌头碱可显著上调FGF2的蛋白表达。因此，选用12-表-欧乌头碱进行体内动物实验，免疫组化结果显示，与模型组相比，12-表-欧乌头碱可明显降低软骨组织中MMP-13和TNF-α的表达，上调FGF2的表达。该研究结果表明，在7种榜那生物碱成分中，12-表-欧乌头碱可通过下调MMP-13和TNF-α的表达，并上调FGF2的表达促进了大鼠骨关节炎损伤的修复。
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