藤黄酸对人胃腺癌细胞BGC-823细胞端粒酶逆转录酶和AKt蛋白磷酸化表达的影响

作者：许毅; 黄新恩; 陈森清; 马国建; 张晓梅; 朱明; 俞军

来源：实用老年医学, 2017, 31(02): 118-122.

• 人胃癌细胞BGC-823
• 藤黄酸
• 端粒酶
• 端粒酶逆转录酶
• 磷酸化AKt

目的探讨藤黄酸(GA)对人胃癌细胞BGC-823端粒酶活性和端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA、AKt蛋白磷酸化表达的影响。方法将处于对数生长期的BGC-823细胞制成细胞悬液,加入96孔酶标板内,加入不同浓度的GA孵育24、48、72 h后,收集细胞,采用MTT比色法测定半抑制浓度(IC50)值;分别采用聚合酶链式反应(PCR)、酶联免疫反应(ELISA)法检测端粒酶的活性和逆转录PCR(RT-PCR)法检测hTERT mRNA的表达;通过免疫共沉淀(IP)法获得hTERT与磷酸化AKt(p-AKt)蛋白的结合体,然后用Western blot法检测p-AKt蛋白表达的变化。结果 GA可以明显抑制胃癌细胞BGC-823的端粒酶活性和hTERT mRNA的表达,呈一定的时效、量效关系;进一步研究发现,GA能够抑制hTERT和p-AKt蛋白的结合,且作用呈时间依赖性,进而影响p-AKt参与的hTERT的活化,从而完成对hTERT转录后的调控,抑制端粒酶的活性。结论 GA可明显抑制胃癌细胞BGC-823端粒酶活性和hTERT的表达,GA对BGC-823细胞生长抑制的作用机制可能与GA影响p-AKt参与的hTERT的活化,从而完成对hTERT转录后的调控有关。

• 单位
  江苏省肿瘤医院; 江苏省中医院