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摘要
为在大肠杆菌中可溶表达具有生物活性的Ⅱa类细菌素，以植物乳杆菌素LPL-1为研究对象，将植物乳杆菌素LPL-1的表达基因克隆至阿拉伯糖启动子下，C-端与His-tag序列融合表达，以单核细胞性李斯特菌ATCC 54002为指示菌，鉴定重组细菌素的活性。通过CRISPR/Cas9基因编辑技术对大肠杆菌BW25331基因组进行编辑，突变过氧化物酶基因(ahpC)，敲除硫氧还蛋白还原酶(trxB)和谷胱甘肽还原酶(gor)基因，成功构建了适宜IIa类细菌素表达的细胞工厂E. coil(ΔtrxB+Δgor+ahpCM)。表达产物经亲和层析纯化后，对其理化性质进行分析，证明重组细菌素具有热稳定性(60～100℃)、酸碱稳定性(pH 2～11)、表面活性剂稳定性。本研究实现了植物乳杆菌素LPL-1在大肠杆菌中的活性表达，重组表达的细菌素具有稳定的理化性质，在食品行业具有广泛的应用潜力。
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