人OCTN2基因片段的克隆及其GST融合蛋白的原核表达

龚东明; 李铮; 郑敏; 朱晓斌; 平萍; 刘玉林; 张伟; 胡双纲; **鑫

摘要

目的从人附睾组织中克隆OCTN2基因,构建PGEX-2T-OCTN2载体,原核表达人OCTN2重组蛋白。方法应用RT-PCR方法从人附睾组织中克隆OCTN2,利用ECoRⅠ和BamHⅠ酶切位点把OCTN2克隆到PGEX-2T载体,酶切和测序鉴定后,大量诱导重组蛋白并回收。结果从人附睾组织中克隆到人OCTN2的基因片段,构建了PGEX-2T-OCTN2载体,表达了预期相对分子质量的融合蛋白并大量回收。结论成功克隆OCTN2,表达并大量回收其融合蛋白,为制备人OCTN2特异性抗体、进一步研究附睾肉碱转运机制奠定了前期基础。

单位
中国科学院; 上海市浦东新区中医医院; 上海交通大学医学院附属仁济医院; 中国科学院上海生命科学研究院

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更新时间：2019-09-12 23:48

人OCTN2基因片段的克隆及其GST融合蛋白的原核表达

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