摘要
目的探讨转化生长因子β1(TGFβ1)信号通路在维甲酸(RA)致腭裂过程中的作用。方法选取810周龄野生型小鼠,构建RA诱导腭裂的小鼠模型,分别取E13.5(E13.5组)、E15.5(E15.5组)和E17.5(E17.5组)的腭突,荧光定量PCR(q-PCR)检测TGFβ1基因的表达,信号通路检测法(Western blot)检测下游p-Smad2(S467)的表达;RA处理原代培养的腭突间充质细胞(MEPM),q-PCR检测TGFβ1基因的表达,Western blot检测下游p-Smad2(S467)的表达。RA和TGFβ1共同处理MEPM,CCK-8法检测细胞的增殖活性。结果 RA诱导的腭裂小鼠中,E13.5组和E15.5组腭突中TGFβ1的表达显著下降(P<0.01),到E17.5时,与对照组的表达水平相当(P>0.05)。p-Smad2(S467)的表达也呈现同样的趋势。RA显著抑制了MEPM中TGFβ1和p-Smad2(S467)的表达,且呈浓度依赖性。RA和TGFβ1共处理组的细胞增殖活性较RA单纯处理组显著上升,体外添加TGFβ1重组蛋白能有效逆转RA对MEPM增殖的抑制作用。结论 MEPM中TGFβ1信号通路在RA致腭裂过程中发挥着重要作用。
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