阴道毛滴虫氢化酶体腺苷酸激酶基因真核表达载体的构建与鉴定

作者：帖超男; 王雅静; 谢辉; 毕世樑; 刘佩娜; 廖琳

来源：预防医学情报杂志, 2008, (11): 862-865.

• 阴道毛滴虫
• 氢化酶体
• 腺苷酸激酶
• 基因
• 克隆
• 序列分析
• 真核表达载体 Trochomonas vaginalis
• Hydrogenosomal
• Adenynate kinase (AK)
• Gene
• Clone
• Sequence analysis
• Eukaryotic expression vector

目的构建阴道毛滴虫氢化酶体腺苷酸激酶(adenynate kinase,AK)基因真核表达载体并予以鉴定。方法根据AK基因已知序列设计合成一对引物,应用PCR技术从阴道毛滴虫基因组DNA中扩增出AK基因,并将其克隆入pMD18-T Simple载体。阳性克隆的重组质粒经酶切及PCR鉴定后,用双脱氧链末端终止法进行基因序列测定。应用BLAST软件辅助分析所测基因与Genbank中阴道毛滴虫氢化酶体AK序列的同源性。克隆载体PMD-18T-AK经限制性内切酶BamHI和XbaI双酶切,得到含这2个酶切位点之AK DNA片段,T4连接酶连接到含有这2个酶切位点的真核表达载体pcDNA3.1(+),构...

• 单位
  四川大学; 四川大学华西第二医院