G蛋白偶联受体激酶3在口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用及其可能的机制

作者：张晗; 罗清琼; 朱丽萍; 陈福祥^*

来源：中国肿瘤生物治疗杂志, 2021, 28(05): 435-442.

DOI：10.3872/j.issn.1007-385x.2021.05.003

• 口腔鳞状细胞癌
• G蛋白偶联受体激酶3
• 增殖
• 迁移
• 侵袭
• 上皮-间质转化
• 基质金属蛋白酶

目的:探讨沉默G蛋白偶联受体激酶3（G protein-coupled receptor kinase 3,GRK3）对口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能的机制。方法:利用Oncomine数据库分析GRK3在正常口腔组织及OSCC组织中的表达水平。用RNA干扰技术敲降GRK3在OSCC细胞WSU-HN6和CAL27中的表达,用qPCR法验证干扰效率后,采用CCK-8法和流式细胞术分别检测敲降GRK3对OSCC细胞增殖和凋亡的影响,Transwell小室法检测对OSCC细胞迁移、侵袭能力的影响,qPCR法检测对OSCC细胞周期、上皮间质转化（epithelial to mesenchymal transition,EMT）和基质金属蛋白酶（matrix metallopeptidase,MMP）相关分子mRNA水平表达的影响,WB法检测EMT及MMP相关分子的蛋白表达水平变化。结果:OSCC组织中GRK3的表达水平显著高于正常口腔组织（P<0.01）。转染si-GRK3后,OSCC细胞中GRK3 mRNA表达水平均下调70%以上。敲降GRK3可显著抑制OSCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力（均P<0.01）,对细胞凋亡无显著影响（P>0.05）。敲降GRK3表达后,OSCC细胞的G0/G1期比例显著增高（P<0.01）,细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、Cyclin D3、细胞周期蛋白依赖性激酶2（cyclin-dependent kinases 2,CDK2）和CDK4基因的mRNA表达降低（均P<0.05）;EMT相关分子波形蛋白（Vimentin）、Zeb1和Slug表达降低,E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达升高（均P<0.05）;MMP3和MMP9表达降低（均P<0.05）,MMP2和MMP7表达无明显变化（均P>0.05）。结论:GRK3可通过调节细胞周期促进OSCC细胞的增殖能力,并通过调控EMT和MMP增强细胞的迁移和侵袭能力。

• 单位
  上海交通大学医学院附属第九人民医院