16S rRNA甲基化酶RmtB耐药重组菌的构建及其稳定性研究

作者：陈琳; 管远红; 黄东璋; 齐富刚; 魏冬霞; 陈瀛川; 张欢; 王亚南; 苏哲君; 张洪涛; 区卓麟; 陈冬冬; 吴怀秀; 于淼淼; 杨雨秋

来源：江苏农业科学, 2018, 46(19): 167-170.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2018.19.044

• 16S rRNA甲基化酶
• RmtB
• 重组
• 分子克隆
• 耐药性

为构建16S rRNA甲基化酶Rmt B重组菌并测定其稳定性,应用分子克隆技术构建16S rRNA甲基化酶Rmt B重组菌,采用菌落PCR、双酶切、药敏试验及序列分析等方法鉴定重组质粒,测定重组菌的生长曲线及传代后的最低抑菌浓度(MICs)以确定重组菌的稳定性。结果表明,构建了16S rRNA甲基化酶Rmt B重组菌pRmt B1、pRmt B2、pRmt B4。重组菌对阿米卡星、庆大霉素高度耐药。在没有抗生素选择压力下传代3次后,3株重组菌的生长曲线基本相似,但只有pRmt B1维持了对庆大霉素和阿米卡星的高度耐药性。由此可知,重组菌pRmt B1较稳定,可作为16S rRNA甲基化酶耐药抑制剂筛选模型。

• 单位
  江苏农牧科技职业学院