基于分子对接探究知母皂苷BⅡ对破骨细胞分化过程中的影响

作者：冯萌; 党院霞; 刘芬; 邢菊玲; 莫紫欣; 罗瑞娇; 周欣欣^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2020, 26(19): 146-152.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20201906

• 知母皂苷BⅡ
• 分子对接
• 核转录因子-κB受体活化因子配基(RANKL)
• RANK
• C-FOS
• RAW264.7细胞

目的:探究知母皂苷BⅡ(TBⅡ)对破骨细胞分化过程中核转录因子-κB受体活化因子配基(RANKL),RANK,原癌基因(C-FOS)基因表达量的影响。方法:利用分子对接软件LeDock对TBⅡ分别与RANKL,RANK和C-FOS进行分子对接打分。RAW264.7细给予可溶性RANKL(sRANKL)干预,设立空白组,sRANKL组(模型组),淫羊藿苷(Ica)组,TBⅡ低剂量组(2μmol·L-1),TBⅡ中剂量组(4μmol·L-1),TBⅡ高剂量组(8μmol·L-1)。相应试剂盒检测破骨细胞分化的标志性酶(TRAP),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测C-FOS,与其上游RANKL/RANK和下游活化T细胞核因子胞质1型(NFATC1)表达量,以及骨保护素OPG的表达量。结果:分子对接打分结果分别为-11.86,-11.38,-12.34 kcal·mol-1,TBⅡ能够与RANKL,RANK和C-FOS结合。与正常组比较,模型组TRAP含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组显著降低TRAP含量(P<0.01),且TBⅡ呈剂量依赖性降低TRAP含量。与正常组比较,模型组RANKL,RANK,C-FOS,NFATC1表达量显著升高(P<0.01),OPG表达量显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组显著降低RANKL,RANK,C-FOS,NFATC1表达量(P<0.01),显著升高OPG表达量(P<0.01)。结论:TBⅡ可能通过调控RANKL/RANK/C-FOS信号通路,抑制破骨细胞前体细胞向破骨细胞的分化,抑制破骨细胞活性,减少骨吸收,改善骨质疏松。

• 单位
  广州中医药大学