摘要

目的 研究黄芪多糖(APS)通过P2X7R通道对大脑中动脉闭塞(MCAO)模型大鼠血脑屏障的影响。方法 建立血脑屏障体外模型及OGD模型,通过试漏实验对体外血脑屏障的形成进行初步判断,LC-MS检测APS对血脑屏障体外模型通透性的影响。将18只SD大鼠随机分为3组:对照组、MCAO+生理盐水组、MCAO+APS组,6只/组。对照组大鼠腹腔注射生理盐水,连续3 d;建立MCAO模型,造模成功后,MCAO+生理盐水组大鼠腹腔注射生理盐水,连续3 d;MCAO+APS组大鼠腹腔注射APS(45 mg/kg),连续3 d。取大鼠脑组织、血清,进行依文思蓝(EB)含量测定,制作标准曲线得到吸光度值换算成EB含量以评价血脑屏障的通透性;运用ELISA检测各组大鼠脑组织中三磷酸腺苷(ATP)含量变化情况;运用Western blot检测各组大鼠脑组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、P2X7R表达水平。结果 经过APS处理可修复ATP或OGD状态下血脑屏障的完整性。与对照组相比,MCAO+生理盐水组、MCAO+APS组大鼠脑组织EB含量增多(P<0.01)、血脑屏障通透性增大(P<0.01),与MCAO+生理盐水组相比,MCAO+APS组大鼠脑组织EB含量减少(P<0.05),血脑屏障通透性改善(P<0.05)。与对照组相比,MCAO模型大鼠脑组织中ATP含量减少(P<0.05),MMP-9、P2X7R表达水平升高(P<0.01);与MCAO+生理盐水组相比,MCAO+APS组ATP含量有所恢复(P<0.01),MMP-9、P2X7R表达水平降低(P<0.05)。结论 黄芪多糖通过稳定脑缺血缺氧状态下的内环境,下调MMP-9表达水平,改善血脑屏障的通透性,起到对MCAO模型大鼠脑组织保护作用;并且其作用机制可能与抑制P2X7R通道相关。