摘要
目的观察微小RNA(miRNA, miR)-124通过靶向激活的蛋白激酶C受体1(RACK1)对胃癌细胞增殖、周期和凋亡的影响。方法选取2020年6月至2022年6月收集的76例胃癌组织和癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肿瘤组织和癌旁组织miR-124表达水平。采用慢病毒介导对照miRNA和miR-124感染人胃癌细胞系BGC-823, 分为对照miRNA和miR-124组, 分别采用细胞计数试剂(CCK-8)和EdU染色分析细胞增殖, 流式细胞术分析两组细胞的周期和凋亡;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-124的靶基因;蛋白质印迹法(Western blot)分析肿瘤组织和细胞靶基因表达及其周期和凋亡蛋白表达。组间比较采用t检验。结果癌旁组织miR-124表达水平(1.06±0.22)明显高于胃癌组织(0.56±0.13), 差异有统计学意义(t=16.940, P<0.05)。对照miRNA组细胞48 h吸光值A(2.09±0.13)明显高于miR-124组(1.36±0.11), 差异有统计学意义(t=10.660, P<0.05)。对照miRNA组细胞EdU阳性率[(86.09±3.35)%]明显高于miR-124组[(73.11±6.69)%], 差异有统计学意义(t=4.254, P<0.05)。对照miRNA组细胞G0/G1期百分比[(39.17±4.91)%]明显低于miR-124组[(54.17±4.41)%], 差异有统计学意义(t=5.569, P<0.05)。对照miRNA组细胞CDK1蛋白表达水平(0.92±0.06)明显高于miR-124组(0.62±0.05), 差异有统计学意义(t=9.180, P<0.05)。对照miRNA组细胞凋亡比例[(5.40±1.29)%]明显低于miR-124组[(18.60±1.91)%], 差异有统计学意义(t=14.000, P<0.05)。对照miRNA组细胞Caspase-3蛋白表达水平(0.86±0.06)明显低于miR-124组(1.36±0.12), 差异有统计学意义(t=8.784, P<0.05)。RACK1是miR-124的靶基因。对照miRNA组细胞RACK1表达水平(1.29±0.08)明显高于miR-124组(0.70±0.08), 差异有统计学意义(t=12.540, P<0.05)。结论 miR-124在胃癌组织低表达导致其靶基因RACK1表达水平显著上调, 进而促进胃癌细胞的增殖和周期, 抑制胃癌细胞的凋亡。
- 单位