大麦醇溶蛋白基因片段克隆和RNAi植物表达载体构建

作者：闫永荣; 张正英; 李静雯; 李淑洁

来源：科技导报, 2010, (12): 52-55.

• 大麦
• 醇溶蛋白
• RNAi表达载体 barley
• Hordein
• RNAi expression vector

为了降低啤酒大麦蛋白的含量,提高啤酒大麦品质,利用甘肃推广面积最大的品种甘啤4号为材料,克隆大麦醇溶蛋白基因保守区序列,构建RNAi表达载体。根据已知大麦醇溶蛋白基因保守序列设计一对特异性引物B2PF5′-CAACCATTTC-CACAGCAACCACCAT-3′,B2PR5′-GAAAGATAGAGTAGACGATTGCACG-3′,采用PCR技术从甘啤4号大麦基因组中获得了1个349bp片段(GP4)。依据载体pHANNIBAL和pART27的结构,分别将GP4按所对应酶切位点正反向插入,利用热激法转化。结果分析显示,克隆出的片段与GenBank(NCBI)中醇溶蛋白基因核苷酸序列同源性高...

• 单位
  甘肃省农业科学院生物技术研究所; 甘肃农业大学