PC4基因RNAi慢病毒载体的构建及有效靶序列鉴定

作者：张真中; 杨春杰; 钱三立; 李冰玉; 邹云增^*

来源：中国临床医学, 2018, 25(03): 427-430.

DOI：10.12025/j.issn.1008-6358.2018.20170504

• PC4
• 慢病毒
• RNA干扰
• 心肌细胞

目的:筛选慢病毒介导PC4 RNA干扰的有效靶序列。方法:通过数据库设计3条PC4干扰候选靶序列,将靶序列构建到慢病毒载体中,转入HEK-293T细胞后,感染H9C2心肌细胞。通过实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法鉴定靶序列干扰PC4的效果。结果:成功构建shPC4慢病毒载体,获得高效感染心肌细胞的慢病毒;感染心肌细胞后实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹显示,shPC4-1具有较高的干扰效果(P<0.05)。结论:成功筛选出高效的PC4RNAi靶序列。

• 单位
  上海市心血管病研究所; 复旦大学附属中山医院