利用基因缺陷细胞模型探讨hOGG1和hMTH1的替补作用

作者：柯跃斌; 吴双; 黄娟; 袁建辉; 邓平建; 程锦泉

来源：中华预防医学杂志, 2014, 48(03): 197-202.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2014.03.009

• RNA干扰
• 基因缺陷
• DNA氧化
• 修复基因
• 生物标志
• 替补作用

目的通过建立基因缺陷细胞模型,探讨修复基因hOGG1与hMTH1在DNA氧化性损伤中的作用与关系。方法利用慢病毒感染人胚肺成纤维细胞(HFL),分别建立hOGG1基因和hMTH1基因缺陷细胞模型。将HFL细胞在100μmol/L的H2O2中孵育12 h,分别利用高压液相色谱串联电化学检测技术及RT—PCR技术分析8-羟基-脱氧鸟嘌呤(7,8-dihydro-8-oxoguanine,8-oxo—dG)水平及hOGG1和hMTH1基因表达水平。结果用高滴度慢病毒感染靶细胞后得到hOGG1基因和hMTH1基因缺陷细胞模型,hOGG1 mRNA表达水平(0.09±0.02)比正常HFL细胞(1.00±0.04)下降了91%,hMTH1 mRNA表达水平(0.41±0.04)比正常HFL细胞(1.02±0.06)下降了60%;用100μmol/L的H2O2诱导12 h,hOGG1基因缺陷细胞的hMTH1基因表达水平(1.26±0.18)相比对照组(1.01±0.07)提高了25%,hMTH1基因缺陷细胞的hOGG1基因表达水平(1.54±0.25)提高了52%;hOGG1基因缺陷细胞的8-oxo—dG水平(2.48±0.54)是对照组(0.80±0.16)的3.1倍,差异有统计学意义(P<0.01),hMTH1基因缺陷细胞(1.84±0.46)的8-oxo—dG水平是对照组(0.80±0.16)的2.3倍,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论利用基因缺陷细胞模型,发现在氧化诱导作用下,修复基因hOGG1与hMTH1在DNA损伤修复活动中可能分别表现出一定的协同性替补作用,hOGG1的替补作用强于hMTH1。

• 单位
  深圳市疾病预防控制中心