摘要
目的探讨微孔化羊脱细胞真皮基质(ADM)复合人脐带间充质干细胞(hUCMSC)促进全层损伤皮肤创面愈合的治疗机制。方法将hUCMSC种植于微孔化羊ADM上共培养,形成复合生物敷料。选用72只裸鼠制作成皮肤全层损伤模型,按随机数字表法分为3组,每组24只,hUCMSC种植于微孔化羊ADM上治疗全层损伤创面组(hUCMSC+微孔化羊ADM组);羊ADM治疗全层损伤组(羊ADM组);碘伏纱布治疗全层损伤创面组(碘伏纱布组)。术后14、21、28 d检测各组裸鼠创面愈合率,运用qRT-PCR技术检测创面组织中Bax和Bcl-2的mRNA的表达,免疫组织化学染色检测创面愈合相关蛋白细胞胶原蛋白Ⅰ和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。数据比较采用单因素方差分析和t检验。结果术后14 d, hUCMSC+微孔化羊ADM组的愈合率为(65.34±14.72)%,明显高于碘伏纱布组[(37.54±10.21)%],也高于羊ADM组[(49.08±11.16)%],差异均有统计学意义(t=19.52、14.72,P<0.05)。随着损伤创面的逐步愈合,术后28 d, hUCMSC+微孔化羊ADM组的愈合率为(98.63±15.41)%,明显高于羊ADM组[(81.74±16.27)%]和碘伏纱布组[(63.47±14.80)%],差异均有统计意义(t=-16.42、20.35,P<0.05)。Bax在hUCMSC+微孔化羊ADM组的创面组织中的表达显著降低,尤其在术后21 d的表达量为0.25±0.06,明显低于碘伏纱布组(0.53±0.16)和羊ADM组(0.41±0.12),差异均有统计学意义(t=3.52、-2.83,P<0.05)。Bcl-2在hUCMSC+微孔化羊ADM组的表达显著高于其他2组,尤其是在术后21 d的表达量为0.63±0.19,明显高于碘伏纱布组(0.34±0.09)和羊ADM组(0.46±0.13),差异均有统计学意义(t=5.31、-6.07,P<0.05)。免疫组织化学技术检测发现hUCMSC+微孔化羊ADM组胶原蛋白Ⅰ和VEGF的表达深棕色细胞虽然比羊ADM组和碘伏纱布组稍微有所增多,但是效果并不显著。结论 hUCMSC+微孔化羊ADM复合敷料,通过携带hUCMSC更能促进皮肤全层损伤的愈合并减少凋亡细胞的产生。
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单位内蒙古医科大学第三附属医院