硒结合蛋白1基因沉默对巨噬细胞硒蛋白表达水平的影响

作者：贾义; 代杰; 杨洁; 张亮亮; 曾柱^*

来源：贵州医科大学学报, 2021, 46(10): 1140-1144.

DOI：10.19367/j.cnki.2096-8388.2021.10.004

• 巨噬细胞
• 硒结合蛋白1
• 基因沉默
• 硒蛋白
• 谷胱甘肽过氧化物酶1

目的研究硒结合蛋白1(SBP1)对巨噬细胞中硒蛋白表达水平的影响。方法用50μg/L佛波酯(PMA)诱导单核细胞株THP-1培养48 h分化为M0型巨噬细胞,设置空白对照组(C组,含转染试剂)、阴性对照组(NC组,含转染试剂和阴性对照引物)及沉默组(Si组,含转染试剂和SBP1 siRNA引物);细胞转染24 h后提取总RNA、48 h后提取总蛋白,采用实时荧光定量PCR法检测SBP1和硒蛋白基因SEPHS2、SELENOH、TXNRD3、GPX1、SELENOK、SELENOS、MSRB1、SELENOT、SELENOW及SELENOV mRNA表达水平,采用免疫印迹法检测SBP1蛋白表达。结果 THP-1细胞经PMA诱导培养48 h后获得M0型巨噬细胞,siRNA转染后,与对照组相比,SBP1 mRNA及蛋白表达水平分别下调76%(P <0.001)和50%(P <0.05); SBP1基因沉默后的巨噬细胞中,硒蛋白SEPHS2、SELENOH、TXNRD3、GPX1、SELENOK和SELENOS mRNA表达上调(P <0.001),硒蛋白MSRB1、SELENOT和SELENOW mRNA表达下调(P <0.01);硒蛋白SELENOV mRNA表达不变。结论 SBP1基因沉默可以调节巨噬细胞中硒蛋白的表达。

• 单位
  贵州医科大学