白术叶片DNA提取方法的优化

作者：蒋小刚; 王华; 周武先; 由金文; 张美德^*

来源：安徽农业科学, 2023, 51(11): 128-131.

• 白术
• DNA
• 提取方法
• 改良CTAB法

[目的]优化白术叶片DNA提取方法，提取高质量DNA,用于分子生物学研究。[方法]以白术叶片为材料，比较常规CTAB法、改良CTAB法、SDS法、试剂盒法提取DNA的效果，并对改良CTAB法中的裂解温度、裂解时间、核分离液解离次数进行优化，用琼脂糖凝胶电泳和微量核酸测定仪检测DNA的浓度和纯度。最后通过ISSR-PCR验证优化的改良CTAB法提取DNA的效果。[结果]4种方法中，改良CTAB法提取白术叶片DNA效果最好。针对叶片的改良CTAB法的优化条件为裂解温度65℃、裂解时间20 min、解离次数2次；ISSR-PCR验证结果表明扩增条带清晰稳定，无拖尾。[结论]优化后的改良CTAB法提取白术叶片DNA质量高，可用于白术种质资源遗传多样性分析。

• 单位
  湖北省农业科学院中药材研究所