钩端螺旋体抗原表位预测、重组、表达及免疫原性分析

作者：杨榆玲; 黄小琴; 史荔; 褚嘉祐; 郭晓奎; 石铁流

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2005, (07): 549-554.

• 计算机预测
• 重组抗原表位
• 融合蛋白表达
• 纯化
• 显微镜凝集试验 Computer prediction
• Recombinant epitopes
• Expression of fusion protein
• Purification
• Microscopic agglutination test(MAT)

目的应用生物信息学方法预测两种钩端螺旋体外膜蛋白的表位,结合基因工程手段进行表位重组、表达和免疫原性分析。方法用预测程序ProPred和ANTIGENIC预测LipL32和Om-pL1的表位,应用PCR技术合成重组表位基因片段,克隆PCR产物构建重组质粒,测序验证。在BL21(DE3)中诱导表达融合蛋白。纯化该融合蛋白,免疫BALB/c小鼠,显微镜凝集试验(MAT法)测定抗体效价。结果在LipL32和OmpL1中各预测到2个既具有MHC结合肽特性又具有B细胞表位特征的肽段。PCR合成的重组表位基因序列中没有出现移码和碱基置换。纯化后融合蛋白纯度>90%。融合蛋白产生的抗体效价为75.79,融合...

• 单位
  上海交通大学; 中国科学院; 中国医学科学院北京协和医院