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摘要
目的建立轮状病毒疫苗污染事件中的外源因子猪圆环病毒1型（porcine circovirus type1,PCV1）感染非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）的检测方法。方法培养感染PCV1的Vero细胞6 d后,通过定性PCR、定量PCR、电子显微镜（电镜）检查和原位杂交检测PCV1的复制与增殖。结果从感染PCV1的Vero细胞培养物提取的DNA,其PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳可见特异性条带;定量PCR检测显示,感染6 d后病毒总拷贝数是感染前的794.3倍;定性和定量PCR的最低检出浓度均为102.0拷贝/ml;电镜观察到PCV1特征性形态病毒颗粒;原位杂交检测到出现深色阳性信号的PCV1阳性细胞。结论 PCV1感染Vero细胞后的复制增殖可以通过上述方法进行检测。
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单位云南大学; 中国食品药品检定研究院
