肉毒毒素蛋白受体sytIIN端片段基因的合成及其在大肠杆菌中的融合表达

作者：史晶; 王慧; 包士中; 侯晓军; 荫俊

来源：中国生物工程杂志, 2007, (07): 17-20.

DOI：10.13523/j.cb.20070705

• 肉毒毒素
• 受体
• MBP融合蛋白
• 原核表达 Botulinum neurotoxin Receptor MBP fusion protein Prokaryotic expression

旨在构建肉毒毒素蛋白受体sytIIN端片段的原核表达载体,并在大肠杆菌pMAL-c2x系统中表达MBP-Syt融合蛋白。根据GenBank中已报道的人sytII基因序列,截取N端氨基酸序列,依据大肠杆菌的偏爱密码子,设计引物人工合成全基因,将全长基因克隆至原核表达载体pMAL-c2x中,重组质粒转化大肠杆菌E.coli ER2566,IPTG诱导表达。表达产物经Amylose Resin亲和层析进行纯化,SDS-PAGE和免疫印记对其进行鉴定,并对该蛋白进行活性的初步分析,为进一步研究毒素与受体相互作用的机制奠定基础。

• 单位
  军事医学科学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室